Een jonge man besluit zichzelf te verbieden om sex te hebben voor een periode van 40 dagen.

Matt wordt gedumpt door zijn vriendin Nicole en kan daar niet overheen komen. Hij versiert het ene meisje na het andere maar zelfs na zes maanden heeft hij er niet een gevonden zoals Nicole. Na een bezoek aan zijn broer, een priester, besluit hij voor een periode van 40 dagen en 40 nachten niets seksueels meer te doen. Wanneer zijn huisgenoot Ryan daar achter komt gaat alles echter mis. Ryan zet een weddenschap op internet over Matt's belofte waar iedereen kan inzetten op de dag dat Matt de fout in zal gaan. Ondertussen komt Matt natuurlijk de liefde van zijn leven tegen in de wasserette. In eerste instantie wil hij niets vertellen over zijn onthouding, maar helaas komt Erica er zelf achter.

Na zijn film 'The Truth About Cats and Dogs' heeft Regisseur Michael Lehmann niet veel noemenswaardige films meer gemaakt. Toch heeft hij nu weer een poging gedaan en probeerde hij van '40 Days and 40 Nights' een soort mix van een tienerfilm en een romantische komedie te maken. Helaas mist de film de humor van bijvoorbeeld 'American Pie' en wordt de romantiek overschaduwd door een overvloed aan perfecte vrouwen die het hebben voorzien op de hoofdpersoon. Wat de film wel interessant maakt zijn de hoofdrollen, Matt gespeeld door de sexy pin-up Josh Hartnett, bekend van 'Pearl Harbor' en Erica, gespeeld door Shannyn Sossamon, bekend van ' A Knight's Tale'.